原薬標準品 – SPEAK UP

はじめに

バイオ医薬品、特にモノクローナル抗体（抗体医薬）は複雑なタンパク質構造を持つため、その品質を保証するには専用の標準物質（Reference Standard）が欠かせない。標準物質は、製剤の一貫性を担保し、安全性・有効性を確保する上での基準となる。

抗体医薬品は、その複雑な構造と多彩な機能から、低分子医薬品とは全く異なる分析・品質保証のアプローチが求められる。中でも標準物質の規格設定は、アイデンティティ確認、ポテンシー評価、不純物モニタリングなど、製剤ライフサイクルのあらゆるステージで品質保証の基盤となる重要なプロセスである。

本稿では、抗体医薬ならではの特殊性を踏まえ、実務レベルで踏むべきステップと留意点を整理しながら、標準物質の役割と設定プロセス、さらには抗体医薬固有の課題について取り上げたい。

＜目次＞
はじめに
標準物質の役割と分類
規格設定の基本ステップ
規制・ガイドラインのポイント
規格設定の主要パラメータと評価方法
抗体医薬ならではの“特殊性”
抗体医薬のマスター標準設定
 ライフサイクル管理
安定性試験および管理
あとがき

標準物質の定義と種類

標準物質とは、製品の品質試験で用いられる定量基準物質である。

一次標準品は、製造者自身がフルキャラクタリゼーションした最上位の基準である。一方、二次標準品は、一次標準品に対して調製・校正された検量線用や現場運用のために使用される。一次標準品は、分子量、各種修飾のプロファイル、純度・凝集体含量などを詳細に解析・記録する。

バイオ医薬品、特に抗体医薬の場合の一次標準品は「マスター・バッチ標準物質」と呼ばれ、二次標準品は「ワーキング標準物質」と呼ばれることもある。

種類	定義・役割
マスター・バッチ標準物質	承認用最終製品バッチまたは開発製造バッチから調製。長期保管用のゴールドスタンダード
ワーキング標準物質	マスター標準を希釈・分注して作成。日常の試験やバリデーションに使用
類縁物質（不純物）標準品	ホスト細胞由来タンパク、架橋体、アグリゲートなど、品質リスク評価用の関連物質

トレーサビリティ
- 各標準の出自／調製条件／CoA（分析証明書）を厳密に管理
ロット管理
- マスターとワーキング間の一致性を定期的に再評価

規格設定の基本ステップ

一次標準品候補の調製
構造的・生物活性的特性の詳細解析
安定性試験による有効期限の設定
二次標準品への校正
承認・運用ガイドラインへの登録

これらのステップはICH Q6Bガイドラインに準拠し、再現性とトレーサビリティを担保する。

規制・ガイドラインのポイント

ICH Q6B（バイオ医薬品の規格論）
- バイオ医薬品の試験手順と受入れ基準を規定
- アイデンティティ、純度、含量、ポテンシーの定義を規定
- 化学的特性
  - ペプチドマッピング、アミノ酸配列確認
- 物理的特性
  - 分子量測定、二次構造解析
- 生物活性
  - 細胞ベースアッセイによる効力定義
- 純度／不純物
  - SEC-HPLC、イオン交換クロマトグラフィー
日本薬局方（JP）での規格設定
- JP第18改正では、抗体医薬品の標準物質について以下のポイントが示されている
  - 標準物質のロットごとの品質確認試験項目
  - 二次標準品の継続的モニタリング方法
  - 長期安定性データの提出要件
- JP規格はICH-Q6Bと整合させつつ、国内での運用に即した追加要件を設けている
USP <1035>（バイオ分析法バリデーション）
- 標準物質の適格性評価およびライフサイクル管理
EP & JP
- 製品モノグラフにおける標準品要件、CoA項目の細則
FDA Guidance
- バイオアッセイのオンラインリファレンス
- ワーキング標準承認フロー

規格設定の主要パラメータと評価方法

アイデンティティ（Identity）
- ペプチドマッピング（LC-MS/MS）によるアミノ酸配列確認
- 抗原結合特性（SPR／Biolayer Interferometry）でターゲットへの結合を検証
高次構造（Higher-Order Structure）
- 円二色性（CD）、微熱量計（DSC）、FT-IR で二次／三次構造を評価
- 化学変性・熱変性プロファイルを比較
純度・異性体プロファイル
- SEC-HPLC／SDS-PAGE
  - アグリゲート・断片を定量
- IEC／cIEF
  - チャージバリアント（酸性型／塩基性型）の分布確認
- 糖鎖プロファイル（2D-LC、MALDI-TOF MS）
  - 主要オリゴ糖構造と％組成
含量・ポテンシー（Potency）
- ELISA／細胞ベースアッセイで機能的活性を測定
- 製造バッチ間ポテンシー比較
  - ワーキング標準を基準に相対値評価
不純物（Related Substances）
- ホスト細胞タンパク質（HCP）
  - ELISA法で許容限界設定
- 抗体架橋体・アグリゲート
  - SEC-HPLCで閾値管理
- プロセス由来低分子（残留プロセス試薬など）
  - LC-MSスクリーニング
物理化学特性
- pH、浸透圧、浸透圧調整剤濃度
- 粘度（高濃度製剤用）

抗体医薬ならではの“特殊性”

下記の因子は標準物質の製造・評価プロセスにおいて特別な分析手法や基準設定を必要とする。

マイクロヘテロジニティ
- 糖鎖修飾や酸性・塩基性バリアントの微妙なバッチ差が製品挙動に影響
- 糖鎖ヘテロジニティは免疫原性や半減期に影響
- 電荷異性体（チャージバリアント）
  - 等電点のばらつき管理
ポテンシーの複合性
- 結合能＋ADCC／CDC活性など複数アッセイの統合評価
- ADCC/CDCや結合能試験の定量化（生物活性）
バッチ間トレンド管理
- 長期保存中の構造劣化（酸化・脱アミノ化）をモニター
プラットフォーム分析法
- 同一プラットフォームで複数製品を評価するための標準化手順
- アグリゲートの検出は、免疫反応リスクの評価が必要

抗体医薬のマスター標準設定

項目	規格値・手法（例）
アミノ酸配列確認	LC-MS/MSペプチドマッピングで100%カバレッジ
結合活性	SPRでKD = 5 × 10⁻¹⁰ M（許容範囲 ±20%）
アグリゲート	SEC-HPLC ≤ 2.0%
チャージバリアント分布	cIEF：酸性型 20–30%、主成分 60–70%、塩基性型 5–10%
糖鎖プロファイル	G0F/G1F/G2F 比率 ±5%
ポテンシー	ADCCアッセイ：相対活性 95–105%

製造ロット間の一貫性を担保するため、マスター標準は−80℃で凍結保存し、3年ごとに主要指標を再確認する。

ライフサイクル管理

Lot-to-Lot Consistency
- ワーキング標準を通じて製品ロット間差を年次トレンドで評価
再標準化／再認証
- 保存期間終了時に再度ペプチドマッピング、ポテンシー試験を実施
変更管理
- 製造プロセスやアッセイ条件変更時はパラレル試験で影響を定量評価
ドキュメンテーション
- CoA、SOP、変更履歴をELN・QMシステムで一元管理

安定性試験および管理

安定性試験データは、二次標準品のロット更新時にも活用され、規格逸脱の早期検出に役立つ。

試験項目	目的	主な手法
長期安定性	有効期限設定	-20℃/4℃保存下での定期試験
加速安定性	劣化プロファイル予測	25℃/60%RH 保管
交差バッチ比較	ロット間一貫性確認	生物活性比較アッセイ

あとがき

バイオ医薬品（抗体医薬）の標準物質規格設定は、ICH Q6Bや各国薬局方の要件をベースに、分子レベルから生物活性まで多角的に実施される。特に糖鎖やアグリゲートなど抗体固有の不均一性に着目した試験設計が、品質と安全性を確保する鍵となる。

抗体医薬の標準物質規格設定は、多層的な品質属性を統合的に担保するチャレンジングなプロセスである。マスター（一次標準）／ワーキング（二次標準）という二段階管理と、多角的な分析プラットフォームを駆使しつつ、ライフサイクル全体で一貫性を維持していくことが重要であることは言うまでもない。